產品介紹
培養基
Vibrio
Thiosulfate Citrate Bile Salts Surcose (TCBS) Agar
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產品說明:
Thiosulfate Citrate Bile Salts Surcose (TCBS) Agar
預期用途
體外診斷用(In Vitro Diagnostic)。用於自臨床檢體及其他樣本中分離培養弧菌屬(Vibrio spp.)之選擇性鑑別培養基。 |
| 產品名稱 : Thiosulfate Citrate Bile Salts Surcose (TCBS) Agar |
成分-典型配方*(用1000 mL水沖調後)
| Yeast extract |
5 g |
| Peptone |
10 g |
| Sucrose |
20 g |
| Na2S2O3‧5H2O |
10 g |
| Sodium cholate |
3 g |
| Sodium citrate‧2H2O |
10 g |
| Oxgall |
5 g |
| Sodium chloride |
10 g |
| Ferric citrate |
1 g |
| Bromthymol blue |
0.04 g |
| Thymol blue |
0.04 g |
| Agar |
15 g |
*配方可依實際性能要求進行調整、補充。
方法原理及操作步驟說明
弧菌屬(Vibrio spp.) 為革蘭氏陰性、無芽孢之桿菌,菌體呈直桿狀或略帶單一彎曲。具有運動性,多數菌株於液體培養基中培養時具有單極鞭毛。大多數菌株可產生氧化酶(oxidase)及過氧化氫酶(catalase),並能發酵葡萄糖但不產生氣體。 Vibrio spp. 廣泛存在於半鹹水及海水等自然環境中,其中部分菌種對人類具有致病性,感染通常與攝食受污染的水或海鮮有關。最常引起腹瀉的菌種包括霍亂弧菌(Vibrio cholerae,霍亂的致病菌)、副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、河弧菌(Vibrio fluvialis)及擬態弧菌(Vibrio mimicus)。創傷弧菌(Vibrio vulnificus)通常不會引起腹瀉,但常自敗血症患者的腸道外感染部位分離得到。¹ TCBS(Thiosulfate-Citrate-Bile Salts-Sucrose Agar,硫代硫酸鹽-檸檬酸鹽-膽鹽-蔗糖培養基) 由 Kobayashi、Enomoto、Sakazaki 與 Kuwahara 於 1963 年研發,是在 Nakanishi 所建立的選擇性培養基基礎上改良而成。²³ TCBS Agar 用於自臨床檢體、環境樣本及食品中選擇性分離與鑑別 Vibrio spp.⁴,同時也是 ISO 21872 及 FDA-BAM 推薦用於食品中弧菌分離的標準培養基。⁵⁶ 蛋白腖(Peptone)及酵母萃取物(Yeast Extract)提供細菌生長所需的氮源、碳源、維生素 B 群及其他必要營養成分。培養基的高鹼性環境,以及添加膽鹽(Oxgall)、硫代硫酸鈉(Sodium Thiosulfate)及檸檬酸鈉(Sodium Citrate),可有效抑制革蘭氏陽性菌及大腸桿菌群(Coliforms)的生長。 培養基中加入氯化鈉(Sodium Chloride),可提供嗜鹽性弧菌最佳的生長環境。蔗糖(Sucrose)作為可發酵醣類,可供弧菌代謝;能發酵蔗糖的菌株會產生酸性代謝產物,使 pH 指示劑 溴百里酚藍(Bromothymol Blue) 與 百里酚藍(Thymol Blue) 由綠色轉變為黃色。 蔗糖的添加亦可作為 Vibrio spp. 的初步鑑別依據。其中,霍亂弧菌(V. cholerae)、河弧菌(V. fluvialis)及溶藻弧菌(V. alginolyticus) 可形成黃色菌落;而副溶血性弧菌(V. parahaemolyticus)、擬態弧菌(V. mimicus) 及大多數創傷弧菌(V. vulnificus) 因不發酵蔗糖,則形成綠色菌落。 培養基中的硫代硫酸鹽可作為硫源,在檸檬酸鐵(Ferric Citrate)存在下,產生硫化氫(H₂S)的菌株可形成黑色反應。培養基的鹼性 pH 有助於提高霍亂弧菌(V. cholerae)的回收率。 TCBS Agar 對腸道細菌具有高度抑制作用;少數 Proteus 屬及腸球菌(Enterococcus) 菌株雖可能生長,但其菌落通常較小且無色,易於與弧菌區分。
品管
所有生產批次的產品在進行品質控制以檢查是否符合規格後方可上市銷售。然而,最終用戶可以根據當地適用的法規、認證要求以及實驗室的經驗自行進行品質控制。以下列出了一些可用於品質控制的測試菌株:
| CONTROL STRAINS |
INCUBATION T°/ T / ATM |
EXPECTED RESULTS |
| V. parahaemolyticus |
ATCC 17802 |
36-38 °C / 18-24 h / A |
good growth, green colonies |
| V.furnissii |
ATCC 11218 |
36-38 °C / 18-24 h / A |
good growth, yellow colonies |
| P.mirabilis |
ATCC 12453 |
36-38 °C / 18-24 h / A |
partially inhibited, yellow-green colonies with black centre |
| E.coli |
ATCC 25922 |
36-38 °C / 18-24 h / A |
inhibited |
A:需氧培養;ATCC是美國典型培養物保藏中心的商標。
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